Preimplantační prenatální diagnostika v rámci reprodukčnímedicíny a reprodukční genetiky

Overview

Integrace reprodukční medicíny a reprodukční genetiky umožňuje připravit postupně i u nás využití nejčas-nější metody genetické prevence - preimplantační prenatální diagnostiku a zdokonalit genetickou prevenci u po-ruch reprodukce. Jsou shrnuty naše prvé zkušenosti s přípravou a rozvojem reprodukční genetiky a preimplan-tační prenatální diagnostiky. Specializované genetické poradenství doporučujeme pro všechny partnery a jejichrodiny s poruchami reprodukce. U 60 % umožní zlepšit genetickou léčebně-preventivní péči a nejméně u 40 %indikuje perikoncepční a prenatálněgenetickou diagnostiku a prevenci. Je jednoznačně nutná pro výběr dárkyňoocytů. Chromozomální aberace, převážně heterochromozomů, byly zjištěny u 4,6 - 5,6 % mužů a žen s poruchamireprodukce. Cytogenetické vyšetření je indikované u všech nevysvětlitelných poruch reprodukce a preferenčněu mužů s počtem spermií menším než 20 x 10 6 /ml. Molekulárněgenetické vyšetření nejčastějších mutací genucystické fibrózy indikujeme u všech partnerů s poruchou reprodukce, nejvyšší záchytnost nosičství mutací lzeočekávat u mužů s obstrukční a neobstrukční azoospermií a oligospermií s počtem spermií do 1 x 10 6 /ml. U mužůs jinak nevysvětlitelnou příčinou poruchy reprodukce doporučujeme vyšetření stupně aneuploidie spermií meto-dou FISH s využitím alfoidních sond k jejímu objasnění a indikaci prenatální diagnostiky při úspěšné fertilizaci.Před vlastní preimplantační diagnostikou považujeme za obligatorní vyšetření klinickogenetická, klinickocytoge-netická a molekulárněgenetická spolu se všemi metodami reprodukční medicíny. Tyto metody jsou optimálněintegrovány v rámci jednoho pracoviště, včetně zajištění prenatální genetické diagnostiky. Využité protokolystimulace ovarií umožnily dosáhnout úspěchu aspirace oocytů v 96 %. Použité embryologické metody vedlyk získání v průměru 4,16 embryí na transfer, 95,6 % transferů embryí na cyklus, 24,5 % klinických gravidita 16,7 % porodů na transfer. U metody ICS1 bylo dosaženo 93 % transferů na úspěšně stimulovaný cyklus.Hypotonizace spermií a izolovaných blastomér umožnila spolehlivou detekci aneuploidií chromozomů X, Y, 13,18 a 21 pomocí metody FISH. Byly zavedeny metody kvantitativní fluorescenční PCR a metody „nested PCR“k detekci aneuploidií a k vyšetření mutací CFTR genu na úrovni jedné buňky. Možnost jejich klinického uplatněnípro preimplantační genetickou diagnostiku bude ověřena na embryích, nepoužitelných pro transfer či jejichkryoprezervaci.

Klíčová slova:
reprodukční medicína, reprodukční genetika, preimplantační prenatální diagnostika, chromo-zomální aberace, azoospermie, oligospermie, mutace CFTR genu, FISH, spermie, oocyty, blastoméry, kvantitativnífluorescenční PCR, genetické poradenství