Current Recommendations by the ELN Expert Panel on AML Diagnosis Management

Z hlediska diagnostiky AML je v současnosti možno provést řadu testů, které upřesňují poznání biologie onemocnění.

Základní diagnostický postup ke stanovení myeloidní malignity

• Vyšetření kompletního krevního obrazu včetně diferenciálního rozpočtu, s rozpočtem ≥ 200 jaderných buněk v nátěru.
• Aspirace kostní dřeně, s rozpočtem 500 jaderných buněk v nátěru − myeloblasty, monoblasty a megakaryoblasty jsou zahrnuty v rozpočtu blastů. Monoblasty a promonocyty (ale ne abnormální monocyty) se započítají u AML s monocytovou či myelomonocytovou diferenciací jako ekvivalentní blastům.
• Trepanobiopsie kostní dřeně – v případě suché aspirace.
• Imunofenotypové vyšetření multiparametrovou průtokovou cytometrií, které umožní identifikovat povrchové a intracelulární markery. Je také důležité najít imunofenotyp asociovaný s leukémií, který umožní další sledování MRD.
• V případě, kdy je aspirace kostní dřeně nemožná a chybějí cirkulující blasty, lze myeloidní fenotyp potvrdit imunohistochemickým vyšetřením biopsie kostní dřeně.
• Detailní demografická data, osobní anamnéza včetně komorbidit a užívaných léčiv, možné expozice toxickým látkám, jiným toxinům (včetně kouření) a dále předchozích malignit i jejich terapie. Důležitá je také rodinná anamnéza (se zaměřením na myeloidní malignity k vyloučení germinální predispozice) a vyhodnocení pacientovy krvácivé anamnézy, jež může souviset například s destičkovými poruchami (a potenciálně i germinální predispozicí k malignitě).

Genetické vyšetření

• Cytogenetické vyšetření, případně i s vyšetřením specifických abnormit pomocí fluorescenční in situ hybridizace (FISH).
• Screeningové vyšetření genových mutací spojených s diagnózou a identifikací potenciálních terapeutických cílů:
  • FLT3 – mutační screening zahrnující stanovení interních tandemových duplikací (ITD) a mutací tyrosinkinázové domény (TKD). Delší přestavby FLT3-ITD nemusejí byt zachytitelné při sekvenování nové generace (NGS), vhodné je užití kapilární elektroforézy;
  • IDH1, IDH2;
  • NPM1;
  • CEBPA (včetně specifikace mutace, protože jen některé mohou být spojeny s příznivou prognózou), DDX41, TP53, ASXL1, BCOR, EZH2, RUNX1, SF3B1, SRSF2, STAG2, U2AF1, ZRSR2.

Většina těchto výsledků by měla být k dispozici v průběhu prvních 3−7 dnů.

• Screeningové vyšetření přestaveb genů a fúzí:
  • PML::RARA, CBFB::MYH11, RUNX1::RUNX1T1, přestavby KMT2A, BCR::ABL1, další fúzní geny, pokud je stanovení k dispozici.
• Další možné přídatné testování může zahrnout následující geny: ANKRD26, BCORL1, BRAF, CBL, CSF3R, DNMT3A, ETV6, GATA2, JAK2, KIT, KRAS, NRAS, NF1, PHF6, PPM1D, PTPN11, RAD21, SETBP1, TET2, WT1.
• V případě podezření na zárodečnou (germline) predispozici je velmi důležité provést vyšetření panelu genů zahrnující známé predispoziční geny.
• U některých mutací (NPM1, CBF) je doporučeno provést kvantitativní polymerázovou řetězovou reakci (qPCR) nebo kapkovou (droplet) digitální PCR (ddPCR) k usnadnění monitorování MRD.

Další vhodný postup

• Detailní vyšetření celkového stavu včetně stanovení výkonnostního stavu (PS ECOG/skóre WHO).
• Biochemické vyšetření a koagulační testy.
• Testování na hepatitidu A, B, C a HIV, sérologické testování herpetických virů (EBV, CMV, HSV, VZV).
• U žen ve fertilním věku vyloučení těhotenství.
• Posouzení vhodnosti k alogenní transplantaci kmenových buněk krvetvorby a typování HLA, případně zajištění vyšetření sourozenců.
• Zobrazovací metody zahrnující rtg srdce a plic, posouzení stavu srdce (EKG, ECHO).
• U lidí ve fertilním věku informace o možné kryoprezervaci spermatu a oocytů.
• Uschování vzorků krve a kostní dřeně, případně jiné tkáně (biopsie kůže) k možnosti odlišení zárodečných a somatických mutací. Důležité je také podepsání informovaných souhlasů k možným dalším vyšetřením uchovávaných vzorků.

(eza)

Zdroj: Döhner H., Wei A. H., Appelbaum F. R. et al. Diagnosis and management of AML in adults: 2022 recommendations from an international expert panel on behalf of the ELN. Blood 2022 Sep 22; 140 (12): 1345−1377, doi: 10.1182/blood.2022016867.

Zkrácenou informaci o přípravku naleznete zde.

2011-CZ-2300016