Použití jednokrokové polymerázové řetězové reakcek detekci Borrelia burgdorferi sensu lato a jejichgenomospecies u klíšťat Ixodes ricinus

Overview

Cílem práce bylo zavedení screeningové PCR do diagnostiky Borrelia burgdorferi sensu lato vevektoru, výběr nejvhodnějšího primeru derivovaného z chromosomální DNA a detekce jednotlivýchgenomospecies.Citlivost primerů popsaných v literatuře (LD, 16S, Wk, 5S-23S) byla testována pomocí různéhomnožství DNA kmenů borelií. Nejcitlivější primer, LD, byl použit pro detekci borelií ve vektoru.Klíšťata byla sbírána v městských parcích od roku 1995 do roku 1997. Celkem bylo vyšetřeno 635klíšťat. Pozitivita souboru se v různých letech lišila: 9,2 % v roce 1995, 3,4 % v roce 1996 a 4,5 % v roce1997. Dospělá klíšťata byla výrazně více infikována než nymfy. Borrelia garinii na lokalitě převládá,Borrelia burgdorferi sensu stricto nebyla dosud detekována. Smíšená infekce Borrelia garinii/Bor-relia afzelii byla nalezena v roce 1997 v jednom vzorku (samice klíštěte).Polymerázová řetězová reakce (PCR) je citlivá a specifická metoda, která je vhodná ke zjištěnípromořenosti klíšťat boreliemi. S poměrně vysokou citlivostí umožňuje rozlišit jednotlivé genomo-species Borrelia burgdorferi ve vektoru. Před jejím použitím je nutno testovat citlivost reakce, a toi v přítomnosti klíšťové DNA.

Klíčová slova:
klíště – lymeská borelióza – PCR – Borrelia.