Apoptóza - vybrané metody detekce apoptózya asociovaných regulačních faktorů natkáňových řezech z nádorového materiálu
:
Z. Pavlovský; V. Vagunda
:
Oddělení patologie, Masarykův onkologický ústav, Brno
:
Čes.-slov. Patol., , 2003, No. 1, p. 6-10
:
K detekci apoptózy (AP) na tkáňových řezech lze využít morfologické hodnocení AP figur světelnouči elektronovou mikroskopií a imunohistochemický průkaz antigenů asociovaných s AP. Bcl-2u řady nádorů inverzně koreluje s AP a je nepřímým markerem počtu AP figur. Imunohistochemickýprůkaz je bezproblémový. Tkáňovou transglutaminázu, která je výrazně exprimovánai v neapoptotických buňkách, nelze považovat za specifický marker AP. Podobně FAS, jehož expresenemusí být bezpodmínečně spojena se vstupem buňky do AP. Kaspázy: v současnosti používanáimunohistochemická detekce nerozlišuje aktivní a neaktivní formy těchto enzymů. AnexinV: technika, detekující fosfatidylserin, normálně lokalizovaný na vnitřní straně buněčné membrány,jenž je při apoptotickém procesu detekovatelný i extracelulárně. Průkaz Anexinu V značenéhokoloidním zlatem lze využít k detekci AP imunoelektronovou mikroskopií, nicméně jde o velmináročnou metodiku. TUNEL, ISEL, ISNTA jsou metody, které označují zlomy DNA vznikající přiapoptóze. TUNEL ve srovnání s morfologickým hodnocením AP figur detekuje o cca 20 % apoptotickýchbuněk více. Označeny mohou být i fragmenty DNA vznikající v jádrech během reparace,po elektrokoagulaci, při autolýze, následkem fixace a řezání tkání. Apostain je metoda založenána průkazu jednovláknových zlomů DNA pomocí monoklonální protilátky, která využívá sníženoustabilitu apoptotické DNA vůči termální denaturaci způsobující její zlomy. Protilátka M30 Cyto-Death detekuje neoepitopy vzniklé při štěpení cytokeratinu 18 kaspázami. Ve srovnání s TUNELemchybí exprese v nekrotických buňkách, neoznačuje však buňky v pokročilých stadiích AP(tělíska). Na rozdíl od některých pilotních studií se nám u M30 (Roche) nepodařilo docílit dostatečnousenzitivitu ani specificitu při detekci AP na mamárních karcinomech. Rutinní, resp. automatizovanéhodnocení AP vyžaduje ověření a standardizaci dalších metodik.
Klíčová slova:
apoptóza - regulace - detekovat
Labels
Anatomical pathology Forensic medical examiner ToxicologyArticle was published in
Czecho-Slovak Pathology
2003 Issue 1
Most read in this issue
- Non-ulcerous Stress Lesions of the Duodenal Mucosa
- Apoptosis - Selected Detection Methods of Apoptosis and AssociatedRegulatory Factors in Histologic Slides of Tumors
- Angiotropic Lymphoma (Intravascular Lymphomatosis): Description of TwoCases
- The Alterations in Adenosine Nucleotides andLactic Acid Levels in Striated MusclesFollowing Death with Cervical Dislocation orElectric Shock