Možnosti ovplyvnenia liberácie alaptidu z dermálnych polotuhých liekov

Príspevok sa zaoberá skúmaním vplyvu bežne používaných humektantov glycerolu (GL) a propylénglykolu (PG) na liberáciu alaptidu (ALA) z 3% (m/m) chitosanových (CHIT) hydrogélov v porovnaní s liberáciou alaptidu (ALA) z krému. Obsah GL a PG v jednotlivých hydrogéloch bol 5 %, 10 %, 15 % (m/m). Alaptid je regeneračne pôsobiaci syntetický derivát prolyl-leucyl-glycin amidu, zatiaľ používaný vo veterinárnej medicíne. Jeho obsah v skúmaných hydrogéloch a kréme bol 1 % (m/m). Experimenty boli vykonané in vitro v temperovanej permeačnej aparatúre. Množstvo uvoľneného ALA bolo merané spektrofotometricky pri 212 nm, po 14. dňoch od prípravy jednotlivých chitosanových hydrogélov a krému. ALA sa uvoľnil v nasledovných množstvách: 14,06 % sa uvoľnilo z krému; 36,54 % z hydrogélu s obsahom 5 % GL (m/m); 37,85 % z hydrogélu s 5 % PG (m/m); 38,37 % z hydrogélu bez obsahu GL a PG; 40,71 % z hydrogélu s obsahom 15 % GL (m/m); 41,21 % z hydrogélu s 10 % GL (m/m); 42,72 % ALA sa uvoľnilo z hydrogélu s 10 % PG (m/m); 43,78 % z hydrogélu s 15 % PG (m/m). V závere možno usúdiť, že prítomnosť GL a PG malo vplyv na liberáciu ALA z dermálnych polotuhých liekov.

Kľúčové slová:
alaptid – liberácia – chitosan – glycerol – propylénglykol

Úvod

Dermálne polotuhé lieky, medzi ktoré patria aj hydrogély a krémy, patria v súčasnosti kvôli jednoduchej aplikácii a malým nežiaducim účinkom k rozšíreným liekovým formám a sú stále študovanou a rozvíjajúcou sa oblasťou farmácie. Táto práca bola zameraná na sledovanie vplyvu polyolov (glycerolu a propylénglykolu) na liberáciu alaptidu z 3 % (m/m) chitosanových hydrogélov v porovnaní s liberáciou alaptidu (ALA) z krému. Obsah glycerolu (GL) a propylénglykolu (PG) v jednotlivých hydrogéloch bol 5 %, 10 %, 15 % (m/m). Alaptid je netoxický, syntetický derivát prolyl-leucyl-glycin amidu ¹⁾, doposiaľ používaný vo veterinárnej medicíne. Pri systémovom podaní vykazuje u pokusných zvierat antiparkinsonické a nootropické účinky ²⁾, pri lokálnom dermálnom podaní stimuluje rast granulačného tkaniva, má regeneračné a epitelizačné účinky ³⁾. Obsah alaptidu vo všetkých skúmaných hydrogéloch a kréme bol 1 % (m/m). GL a PG použité v tejto práci, sú bežne používané enhancery a humektanty, majú aj mierne konzervačné účinky.

Všetky experimenty boli vykonané in vitro v temperovanej permeačnej aparatúre. Množstvo uvoľneného ALA sa meralo spektrofotometrickou metódou pri 212 nm, po 14. dňoch od prípravy jednotlivých chitosanových hydrogélov a krému. Na základe zistených výsledkov možno predpokladať, že skúmané chitosanové hydrogély s rôznymi koncentráciami GL a PG sú z hľadiska liberácie ALA vhodnejšou liekovou formou ako krém.

POKUSNA ČASŤ

Použité chemikálie

Alaptid – Cyklo[L-alanyl-1-amino-1-cyklopentankarbonyl] v mikronizovanej forme (VUFB-15754); chitosan – stredná molekulová hmotnosť (Sigma - Aldrich, USA); glycerol 85% (Lachema, CZ); propylénglykol (Interpharm, SR); konzervant Sepicide HB^® (Seppic ADINOP CO., LTD); chlorid sodný (Inerpharm, SR), kyselina mliečna (Interpharm, SR); metylparabén (Merck, SR); propylparabén (Merck, SR); permeačná celofánová membrána (EKOZ s.r.o.,SR); čistená voda (Katedra galenickej farmácie, Bratislava, SR)

Použité prístroje

Permeačná aparatúra vyrobená na katedre galenickej farmácie, Farmaceutická fakulta Univerzity Komenského, Bratislava, SR; Spektrofotometer – Philips Pye Unicam 8625 UV/VIS Ltd., (Cambridge, GB)

Zloženie hydrogélov

Keďže chitosan gélovatie len pri kyslom pH, ako disperzné prostredie na prípravu príslušných hydrogélov bola použitá 1% (m/m) kyselina mliečna. Liečivo ALA bolo použité vo všetkých hydrogéloch v 1% koncentrácii (m/m). Polyoly (GL a PG) sa v hydrogéloch nachádzali v 5 %, 10 % a 15 % (m/m) koncentrácii. Pre porovnanie bol pripravený aj chitosanový hydrogél 3 % bez obsahu GL a PG. Blanky príslušných hydrogélov boli pripravené bez obsahu ALA. Hydrogély sa skladovali v tme, 14 dní pri laboratórnej teplote.

Zloženie krému

Krém bol pripravený v nasledovnom zložení: Polysorbat 60 5 % (m/m), cetylstearylalkohol 5 % (m/m), tekutý parafín 15 % (m/m), PG 5 % (m/m), ALA 1% (m/m), metylparabén 0,2 % (m/m), propylparabén 0,04 % (m/m), čistená voda 68,76 % (m/m) na 100 g krému. Blank bol pripravený bez obsahu ALA. Pripravené krémy sa skladovali v tme, 14 dní pri laboratórnej teplote.

Liberácia a stanovenie obsahu liečiva

Uvoľňovanie ALA z 3% chitosanových hydrogélov a krému prebiehalo v 6. paralelných komôrkach. Každá komôrka obsahovala 3 g gélu alebo krému (na strane donora) a 20 ml fyziologického roztoku (0,9% NaCl m/m) na strane akceptora. Aparatúra bola počas celého experimentu temperovaná na teplotu 37 °C Ī 1 °C. Odbery vzoriek sa robili v časovom rozsahu 3 hodiny, konkrétne po 15., 30., 45., 60., 90., 120. a 180. minúte od začiatku liberácie. Vzorky sa po odbere ihneď zriedili čistenou vodou a spektrofotometricky sa zmerali pri 212 nm oproti blanku.

Výsledky

Uvoľnené množstvá ALA z príslušných druhov 3% chitosanových hydrogélov a krému sú vyjadrené v percentách a uvedené v tabuľke 1. Grafický priebeh liberácie ALA z jednotlivých druhov chitosanových hydrogélov bez a s obsahom GL v porovnaní s liberáciou ALA z krému znázorňuje obrázok 1 a grafický priebeh liberácie ALA z jednotlivých druhov chitosanových hydrogélov bez a s obsahom PG v porovnaní s liberáciou ALA z krému znázorňuje obrázok 2.

Najmenšie množstvo ALA (14,06 %) sa po 14 dňoch skladovania uvoľnilo z krému. Z 3% chitosanových hydrogélov sa uvoľnili väčšie množstvá, pričom najväčšie množstvo ALA sa po 14. dňoch skladovania uvoľnilo z chitosanového hydrogélu s obsahom 15 % PG (43,78 %), najmenšie množstvo ALA sa uvoľnilo z chitosanového hydrogélu s obsahom 5 % GL (36,54 %) a 5 % PG (37,85 %). Z ostatných druhov hydrogélov sa ALA uvoľnil v nasledovných množstvách: 38,37 % z hydrogélu bez obsahu GL a PG; 40,71 % z hydrogélu s obsahom 15 % GL; 41,21% z hydrogélu s 10 % GL a 42,72 % ALA sa uvoľnilo z hydrogélu s 10 % PG.

Z uvedených výsledkov vyplýva, že glycerol a propylénglykol mali vplyv na liberáciu ALA len, ak sa nachádzali v hydrogéloch vo vyšších koncentráciách, ako 5 % (m/m).

Tento výskum bol podporený grantom Univerzity Komenského UK 104/2008, grantom VEGA 1/0320/08 a grantom FaF UK 11/2008.

Došlo 6. října 2008

Přijato 20. října 2008

Adresa pro korespondenci:

Mgr. Veronika Šimunková

Katedra galenickej farmácie FaF UK

Odbojárov 10, 832 32 Bratislava, Slovenská republika

e-mail: simunkova@fpharm.uniba.sk