VÝZNAM INTERFÁZICKÉ FLUORESCENČNÍ IN SITUHYBRIDIZACE (I-FISH) PRO VYŠETŘENÍ NEMOCNÝCHS CHRONICKOU LYMFATICKOU LEUKÉMIÍ (CLL)

Východisko.
Klasickým cytogenetickým vyšetřením buněk kostní dřeně nebo periferních B-lymfocytů bylozjištěno, že nejčastější změnou chromozómů u chronické lymfatické leukémie je trizómie 12. Molekulárně cytoge-netická metoda tzv. interfázická in situ hybridizace, kterou je možné vyšetřovat i nedělící se buňky, však dokázala,že chromozómových změn u CLL je daleko víc a že mají přímý vztah ke vzniku a průběhu onemocnění.Metody a výsledky. Během posledních dvou let vyšetřujeme buňky kostní dřeně nemocných s CLL kroměklasickou cytogenetickou metodou G-pruhováním také fluorescenční in situ hybridizací. Pomocí centromerickéa-satelitní sondy pro chromozóm 12 sledujeme početní odchylky v dělících i nedělících se buňkách, dále kosmido-vými sondami hledáme drobné delece v oblasti 13q14 (Rb gen) a 17p13 (p53 protein). Tyto geny jsou zodpovědnéza buněčné dělení a jsou dávány do přímé souvislosti se vznikem nádorových procesů. U CLL řešíme v současnostiotázku, zda početní (trizómie 12) a strukturní (delece) chromozómové změny jsou primární či sekundární změnoua jaký je jejich vztah k průběhu onemocnění. Sondou CEP12 jsme vyšetřili 93 nemocných, u 24 z nich (tj. 25,8 %)jsme zjistili existenci buněčného klonu s trizómií 12. Zastoupení klonu bylo 2,5-75,5 % buněk a klasickoucytogenetikou byla jeho existence prokázána jen u 2 nemocných. Delece v oblasti 13q14 byla prokázána sondou LSID13S319 u 24 nemocných ze 73 (32,8 %), rozsah klonu 2,5-80,0 % buněk, klasickou cytogenetikou s potvrzenímFISH byla delece 13q14 nalezena jen u 1 nemocného. Deleci 17p13 jsme u 61 pacientů vyšetřených sondou LSI p53zjistili u 14 (22,9 %), a to vždy jen metodou FISH. Rozsah klonu 2,5-34,0 % buněk. Deleci del(11)(q23) jsme nezjistiliu žádného z 12 vyšetřených pacientů. Všechny sondy jsou od firmy VYSIS™.Závěry. Interfázická FISH je velmi citlivou metodou, kterou lze u vysokého procenta pacientů s CLL prokázatchromozómové odchylky. Náš soubor nemocných s CLL dále rozšiřujeme a hledáme korelace mezi molekulárně-cytogenetickými, imunologickými, morfologickými a prognostickými ukazateli.

Klíčová slova:
CLL, I-FISH, trizómie 12, delece 13q, delece 17p, delece 11q.