Určování krevního systému AB0 z tepelnědegradovaných krevních stop na sérologickéa molekulárně genetické úrovni

Overview

Určování krevního systému AB0 stále patří k základním laboratorním úkolům nejen v tzv. forenzníchpřípadech. Pokud jsou však analyzované vzorky nějakým způsobem degradované, může přijejich zpracování docházet k nejrůznějším problémům.Od šesti dobrovolníků (třech žen a třech mužů) byly odebrány vzorky srážlivé krve, ze kterýchbyly následně na sterilní bavlněné čtverečky vytvořeny krevní skvrny. Krevní skvrny byly inkuboványpři třech různých teplotách (22 °C, 37 °C, 56 °C) po různá časová období (1 den, 1 týden, 14dní, 1 měsíc, 3 měsíce, 6 měsíců, 1 rok). Krevní skvrny degradované při 22 °C jsme analyzovali taképo 3,5 hodinách inkubace. Pro doplnění jsme se pokoušeli určit krevní skupinu AB0 po tepelnédegradaci při vysoké teplotě, a to při 200 °C po dobu 10 min.Pro určení krevního systému AB0 na molekulárně genetické úrovni byla použita polymerázovářetězová reakce k amplifikaci určitého úseku genu pro glykozyltransferázu a ze sérologickýchmetod metoda smíšené aglutinace a vysycovací metoda dle Therkelsena.Vzhledem k pokroku v molekulárně genetických metodách se předpokládalo, že tyto metody vyřešíproblém také s různě degradovanými vzorky. V této práci však bylo zjištěno, že klasické sérologickémetody mohou být v některých případech úspěšnější.

Klíčová slova:
systém AB0 – analýzy DNA – glykozyltransferáza – smíšená aglutinace – vysycovacímetoda dle Therkelsena