Folikulární lymfomy: molekulární diagnostikat(14;18)(q32;q21) – fluorescenční in situhybridizace, kvalitativní a kvantitativní PCR

Overview

Folikulární lymfomy (FL) jsou diagnostikovány na základě histologického obrazu a imunohistochemickéhoprofilu (CD20+, CD79alfa+, CD10+, BCL-2+, CD5-). U většiny nemocných s FL je přítomnatranslokace t(14;18)(q32;q21). Gen BCL2 (18q21) se dostává pod kontrolu regulačníchoblastí genu IGH (14q32) a tím dochází ke zvýšené expresi proteinu BCL-2. Průkaz translokacelze využít pro následné monitorování nemocných (infiltrace kostní dřeně a periferní krve nádorovýmibuňkami). Cílem studie bylo zavést na pracoviště metodu kvantitativní PCR (RQ-PCR, „realtimequantification“) pro stanovení množství buněk nesoucích translokaci t(14;18) u nemocnýchs FL. Pro vyhledání translokace jsme použili metodu fluorescenční in situ hybridizace na interfázickýchjádrech (I-FISH) v histologických řezech. Pomocí kvalitativní PCR jsme vybrali FL sezlomem genu BCL2 v hlavní zlomové oblasti (mbr). U nemocných s tímto znakem jsme pomocíRQ-PCR stanovovali relativní množství nádorových buněk nesoucích t(14;18). Množství buněks touto translokací v lymfatických uzlinách bylo podstatně vyšší než v kostní dřeni či v periferníkrvi. Metoda RQ-PCR, na rozdíl od kvalitativní PCR, umožňuje nejen konstatovat přítomnostnádorových buněk v periferní krvi a v kostní dřeni, ale jejím zásadním přínosem je určení množstvínádorových buněk nesoucích t(14;18). Metoda RQ-PCR umožní sledovat aktivitu onemocnění(přechod do remise nebo vznik relapsu) a zjistit nástup dřeňového relapsu ještě před morfologickyprokazatelnou infiltrací kostní dřeně nebo periferní krve.

Klíčová slova:
folikulární lymfom – translokace t(14;18) – I-FISH – kvalitativní PCR – kvantitativníRQ-PCR – minimální residuální nemoc